Notice: Undefined index: source in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_top.php on line 245
Notice: Undefined index: HTTP_REFERER in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_top.php on line 255
Вирусологические исследования
Реакция коагглютинации (РКОА) основана на способности белка А золотистого стафилококка (штамм Cowan 1) соединяться с Fc-фрагментами lg человека. При этом Fab-фрагменты остаются свободными для реакции с гомологичными антигенами.
Основываясь на этом принципе, Мазанкова Л. Н. и Косоротико-ва А. И. внедрили в пpaктику тест твердофазной коагглютинации для индикации ротавирусного антигена в фекалиях больных. В качестве диагностикума использовали микробные клетки стафилококка, обработанные гипериммунной сывороткой против ротавируса обезьян (SA 11). Титр антигена определяли по наибольшему разведению, вызывающему коагглютинацию бактерий, покрытых антителами (на ++) на твердой фазе лунок панелей из полистирола.
Авторы установили специфичность теста при обследовании 410 детей в возрасте от 1 месяца до 14 лет, из которых у 84 (21%) идентифицирована ротавирусная инфекция (Мазанкова Л. Н., Косоротикова А. И., 1989).
Применение РКОА параллельно с ИФА и РАЛ показало близкую корреляцию результатов использованных методов (Zhang Y. et al., 1989 Pereira V. et al., 1992 Jap K. et al., 1992). Однако имеются сведения о появлении неспецифических реакций с копроматериалами, которые можно устранить предварительной адсорбцией взвесью стафилококков.
В то же время, несмотря на совпадение результатов обследования материалов РКОА и ИФА, чувствительность ее и специфичность оказалась ниже, чем у ИФА и сравнима с латекс-агглютинацией (Jap К. et al., 1992).
Таким образом, результаты применения РКОА позволяют рекомендовать ее для диагностики ротавирусной инфекции в лабораториях, где отсутствует возможность использования более чувствительных и специфичных методов. Однако апробированная в последнее время модификация РКОА и радиоиммунопреципитации с использованием белка А золотистого стафилококка позволила значительно повысить чувствительность и специфичность метода и изучить иммунологический ответ к VP2, VP6 и NSP2 в сыворотках и копроматериалах детей с RV инфекцией (Colomina I. et al., 1998).
Реакция агглютинации латекса (РАЛ) применяется в лабораторной пpaктике в связи с усилившейся в последние годы тенденцией использовать в качестве носителей антигенов и антител инертных синтетических материалов. С этой целью используют полистирольные латексы — синтетические глобулы со стандартным размером частиц около 0,8 мкм.
Более мелкие по размеру частицы (0,2-0,3 мкм) оседают в реакциях медленно и требуют ультрацентрифугации в процессе приготовления диагно-стикума, крупные же ( 1 мкм) часто дают неспецифические реакции. Частицы латекса, предварительно адсорбированные антителами (антигенами), приобретают способность агглютинироваться в присутствии гомологического антигена (антитела) и визуализируют специфический комплекс антиген-антитело.
С целью повышения специфичности и чувствительности метода латексные частицы могут быть сенсибилизированы иммуноглобулинами (Amer A. et al., 1990). В связи с простотой и скоростью проведения исследования, а также низкой стоимостью латекс-агглютинация используется в лабораторной пpaктике достаточно широко: Ruggeri F. et al., 1992.
В настоящее время налажен выпуск коммерческих тест-систем для латекс-агглютинации, что послужило основанием для проведения работ по сравнительной оценке их диагностической эффективности.
Обобщенные результаты оценки РЛА и других лабораторных методов обнаружили, что показатели чувствительности и специфичности РЛА по сравнению с ПЭМ, ИФА, ЭФ в ПААГ были достаточно высоки и равнялись 70-96% и 80-100% соот-ветствено (Santos N. et al., 1989 Molyneaux P. J. et al., 1989 Amer A. et al., 1990 Hendricks M. K. et al., 1995). Применение моноклональных антител еще более повышало диагностическую ценность РЛА (Dennehy Р. et al., 1988 Zbinden R. et al., 1992 Sanchez R. et al., 1993).
Наряду с коммерческими латекс-системами исследователи применяют и лабораторные тесты, которые дают сопоставимые с ними результаты (Amer A. et al., 1990).
В то же время ряд авторов указывали на то, что применение РЛА не лишено недостатков, так как дает определенное число ложных результатов. Так, при обследовании 200 больных детей методами ИФА и РЛА выявлено 11 ложнонегативных проб при показателях чувствительности и специфичности равных 86 и 95% соответственно (Amer A. et al., 1990).
Позднее другие авторы при обследовании 585 проб стула больных детей методом РЛА и ЭФ в ПААГ получили показатели чувствительности и специфичности равные 96 и 100% соответственно. При этом обнаружено 6 ложноотрицательных и 3 ложноположительных результата в отличие от ЭФ в nAAT.(Zbinden R. et al. 1992).
По данным Hendricks М. К. et al. обследование 103 детей в возрасте от 1 месяца до 5 лет методами ПЭМ, ЭФ в ПААГ и РЛА показало, что чувствительность этих методов равнялась 84, 90 и 80%, а специфичность 100, 100 и 81% соответственно. Авторы обнаружили 15% ложноположительных результатов по данным РЛА (Hendricks М. К. et al., 1995), что может быть связано при рота-вирусном гастроэнтерите с наличием крови в исследуемом материале.
В связи с этим при получении положительных реакций в РЛА с образцами, содержащими кровь, результаты следует интерпретировать с осторожностью и подтверждать другими методами (Bendall R. et al., 1991).
Таким образом, РЛА представляет собой наиболее простую диагностическую реакцию обнаружения ротавирусов. Являясь ценным методом экспресс-диагностики и обладая высокими показателями чувствительности и специфичности, этот метод, однако, не имеет никаких преимуществ перед ИФА, ПЭМ, ЭФ в ПААГ, кроме скорости проведения реакции, и нуждается в подтверждении другими методами.
Резюмируя материалы, следует отметить, что в целом осадочные тесты находят широкое применение в лабораторной диагностике ротавирусной инфекции в связи с высокой чувствительностью и скоростью получения результатов, простотой постановки и учета, а также отсутствием необходимости использования сложного оборудования и дорогостоящих реагентов.
Диагностические методы, основанные на выявлении вирус-специфических РНК. Разработка молекулярно-биологических методов в вирусологии привела к внедрению в пpaктику ряда новых диагностических тестов, основанных на выявлении вирусных РНК.
Их использование открыло возможность подхода к молекулярной эпидемиологии и позволило решить некоторые вопросы таксономии ротавирусов. Одним из первых диагностических методов этой группы стал электрофорез вирусного генома в геле.
Электрофорез вирусных РНК в полиакриламидном геле (ЭФ в ПААГ) достаточно универсален и широко распространен как в научно-исследовательских, так и пpaктических лабораториях. Благодаря своей высокой специфичности и чувствительности он позволяет решать целый комплекс проблем, связанных с ротавирусной инфекцией, и находит применение в диагностике, эпидемиологии и профилактике.
Возможность применения этого метода обусловлена уникальным хаpaктером распределения в геле одиннадцати сегментов вирусного генома и большой устойчивостью ротавирусной РНК к действию факторов окружающей среды. Существует несколько модификаций проведения ЭФ в ПААГ.
Незначительно отличаясь друг от друга, все они основаны на экстpaкции РНК ротавирусов, разгонке выделенных РНК в полиакриламидном геле под воздействием электрического поля и визуализации результатов разгонки РНК вирусного генома. Изменения могут быть на каждом из этих этапов проведения ЭФ в ПААГ. Так, выделение РНК ротавируса может проводиться непосредственно из фекалий, минуя стадию получения очищенного вируса возможно предварительное разделение одно- и двунитчатых РНК, введение метки 32Р, обработка исследуемого материала нуклеазой S1, разрушающей однонитчатые РНК структуры варьирует состав буферных растворов, процентное содержание разделяющего и концентрирующего геля сила тока при электрофорезе, методы окраски.
Время проведения исследования составляет 24-36 часов. В результате на полосах геля после его окраски нитратом серебра или этидиум-броми-дом выявляются профили вирусной РНК, соответствующие 11 сегментам генома вируса (Unicomb L. Е. et al., 1993 Assouli S. M. et al., 1995 Bos P. et al., 1995 Васильев Б. Я. и др., 1995 Szczepaniak Z. et al., 1996 Holmes J. H., 1996 Steele A. D. et al., 1996 Markowska-Daniel J. et al., 1996 Espinoza F. et al., 1997 Adah M. et al., 1997 Wu H. et al., 1998).
При соблюдении стандартности условий проведения электрофореза расположение сегментов генома достаточно стабильно и позволяет идентифицировать изолят на основе индивидуальности его фореграммы. Следует отметить, что хаpaктер распределения сегментов генома на фореграмме является генетически устойчивым признаком, и любые изменения в аминокислотной последовательности генома влекут за собой изменение скорости миграции вирусных белков (Kuzuya М. et al., 1996).
Более того, хаpaктер фореграммы, присущей определенному изоляту, может служить в качестве инструмента для расшифровки вспышек, выявления путей и источников заражения (Oishi J. et al., 1993 Broor S. et al., 1993 Beque R. et al., 1992). К тому же, именно этот метод позволил разделить ротавирусы на две подгруппы с так называемыми «короткими» или «длинными» фо-ретипами (обусловленными меньшей или большей подвижностью 10 и 11 сегментов генома), что имеет принципиальное значение для классификации RV популяции.
Следовательно, ЭФ в ПААГ может быть с успехом использован в диагностике, эпидемиологии, классификации и по отношению к целому ряду методик (РАЛ, ГА, выделение вируса на культуре клеток) — референс -методом.
Исследования, проведенные рядом авторских коллективов, показали, что ЭФ в ПААГ обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Сравнительное изучение этих параметров применительно ЭФ в ПААГ, ПЭМ и РЛА, проведенное при обследовании 103 детей, показало, что чувствительность составляла 90, 84 и 80%, а специфичность 100, 100 и 81% (Hendricks М. К. et al., 1995).
Аналогичные данные, с привлечением помимо указанных методов еще и ПЦР и ИФА получены Buesa J. и Husain М. Правда, чувствительность ЭФ в ПААГ, по данным этих авторов, несколько уступает результатам ПЦР и ИФА, однако специфичность составляет 100% (Husain М. et al., 1995 Buesa J. et al., 1996). Подобные результаты получены и нами при исследовании фекалий от 50 больных ОКЗ методами ПЭМ, ИФА и ЭФ в ПААГ. Показатели положительных находок в ЭФ в ПААГ составили 28% против 35% в ИФА и ПЭМ.
Однако следует отметить, что в трех пробах, где ротавирусы в ПЭМ обнаружены не были, по данным ЭФ в ПААГ зафиксирована фореграмма, хаpaктерная для ротавируса (Васильев Б. Я. и др. 1990). Более поздние наши исследования, проведенные на материале 510 больных ОКЗ с использованием ИФА, ПЭМ и ЭФ в ПААГ, позволили нам подтвердить ротави-русную этиологию заболевания в 37 и 23% соответственно (Васильев Б. Я. и др.
1995).
Maldonado A. et al. (1998) при сравнительном исследовании копроматериалов детей, госпитализированных с диареей, методами ЭФ в ПААГ и ИФА документировал RV природу заболеваний в 42,7 и 49,5% соответственно.
Необходимо отметить, что помимо горизонтального применяется и вертикальный электрофорез, который, по мнению ряда авторов, сопоставим с горизонтальным по специфичности и чувствительности, но более прост. При его проведении для визуализации результата авторы предлагают включать бромистый эти-дий непосредственно в гель и использовать один и тот же гель для нескольких исследований.
Ими также было сконструировано устройство с ультрафиолетовой подсветкой, позволяющее легко и удобно читать фореграммы (Zbinden R. et al., 1992).
Модификацию вертикального электрофореза с визуализацией фореграмм методом серебрения предложили Giardano М. О. et al. (1997). Полученные ими данные показали, что новая модификация чувствительнее, специфичнее и дешевле, чем общепринятый ЭФ в ПААГ.
Таким образом, метод ЭФ в ПААГ в настоящее время нашел широкое применение в лабораториях разных стран для диагностики RV. Многочисленные сравнительные испытания этого метода с ПЭМ, ИЭМ, РАЛ и ИФА свидетельствуют о его высокой специфичности и чувствительности, а также возможности применения ЭФ в ПААГ в качестве референс-метода при изучении новых тест-систем.
Использование электрофореза в полиакриламидном геле с целью выявления источников инфекции и путей ее распространения, а также расшифровки этиологии эпидемических вспышек явилось основой для успешного решения актуальных вопросов молекулярной эпидемиологии.
Процесс переноса белков (Western-blot) или нуклеиновых кислот (Dot-blot или Northern-blot и Southern-blot) из электрофоретической матрицы и их иммобилизация на поверхности твердой фазы называется блотингом, а полученный отпечаток — блотом. При анализе блотограмм с помощью иммунных сывороток метод называют иммуноблотингом.
В качестве зондов обычно используют либо РНК, трaнcкрибированные in vitro на матрице вирусного генома, либо клоны комплементарной ДНК, полученной на матрице вирусного генома с использованием обратной трaнcкриптазы и последующим молекулярным клонированием. Ранее метку зондов осуществляли изотопами 125J или 32Р, но в последние годы применяют нерадиоактивные метки — биотин или ферменты (щелочная фосфатаза, пероксидаза и др.), что существенно упрощает метод, поскольку снимает вопросы изотопной безопасности.
В этом случае результаты реакции фиксируются в виде цветовых пятен, образующихся под воздействием фермента на добавляемый субстрат, что свидетельствует о гибридизации зонда с РНК вируса в исследуемом материале.
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Факт – в самую первую очередь жир уходит с бедер (внутренняя часть, «уши») и ягoдиц...
15 08 2026 19:52:44
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Нервная система, желудок, легкие, сердце — все требует внимания...
13 08 2026 17:49:25
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Как и косметикой на основе икры, красной и чёрной...
12 08 2026 10:50:21
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
А «китайским» он стал по той причине, что его появление ознаменовалось именно открытиями, сделанными китайцами...
10 08 2026 15:35:23
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
В инструкции к амброксолу выделены следующие эффекты, производимые лекарственным средством:При его приеме уменьшается вязкость бронхиального секрета – мокрота разжижается...
09 08 2026 23:24:20
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
В ней есть все, что радует человеческий глаз – заснеженные вершины гор, перевалы, кристальные водопады, горные реки, сказочные леса, тайга и многое другое...
08 08 2026 2:50:17
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Затем начинается переход к другой фазе, подразумевающей употрeбление в пищу продуктов с ценностью 0 баллов, добавляя в рацион питания ложку масла из оливок каждый день...
07 08 2026 13:28:11
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Эти танки были очень медленными и использовались только для защиты пехоты...
06 08 2026 14:47:13
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Специалист, проведя адекватную оценку состояния больного, назначает грамотное лечение...
05 08 2026 2:16:18
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Какими районами образован столь близкий нам с точки зрения культуры и истории город?Содержание статьи:Верхний городЭто одна их стариннейших частей Минска...
04 08 2026 6:40:38
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Поэтому, очень важно знать, когда собеседник врёт, а когда говорит правду, чтобы отгородить себя, во-первых, от негативных эмоций, а во- вторых, от нежелательных людей...
03 08 2026 14:16:25
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Если же говорить о последствиях курения, то, по мнению 22%, они неизвестны, 35% опрошенных заявили об опасности возникновения paка легких, 25% респондентов указали на бронхит и прочие недуги дыхательной системы...
02 08 2026 23:32:33
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Но не будем «копаться» в женских мыслях, а поговорим о том, как можно понравиться парню, ведь не каждой дeвyшке это удается сделать...
01 08 2026 7:35:21
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Салон косметологии «Эксклюзив» по праву признан лучшим салоном Саратова...
31 07 2026 12:20:44
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Однако самая первая вещь, которая выбирается с особой скрупулёзностью, это соска...
30 07 2026 7:44:21
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Как не позволить деньгам стать причиной разлада в семье, но при этом сохранить бюджет в полном порядке?Для начала запомните простую вещь...
29 07 2026 7:18:43
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Растение нельзя отнести ни к деревьям, ни к кустам, это исключительное явление природы...
28 07 2026 13:20:13
Warning: include(/var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/lessons/139696.php): failed to open stream: No such file or directory in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/index-add.php on line 72
Warning: include(/var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/lessons/139696.php): failed to open stream: No such file or directory in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/index-add.php on line 72
Warning: include(): Failed opening '/var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/lessons/139696.php' for inclusion (include_path='.:/usr/share/pear:/usr/share/php') in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/index-add.php on line 72
Warning: include(/var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/lessons-raw//139696.php): failed to open stream: No such file or directory in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/index-add.php on line 75
Warning: include(/var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/lessons-raw//139696.php): failed to open stream: No such file or directory in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/index-add.php on line 75
Warning: include(): Failed opening '/var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/lessons-raw//139696.php' for inclusion (include_path='.:/usr/share/pear:/usr/share/php') in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/index-add.php on line 75
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Они недоумевают, почему их любимый крошка превратился в маленького тирана, который считает, что именно вокруг него должна вертеться Земля...
26 07 2026 18:42:54
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Содержание статьи:Маленькие резинки начали использоваться для плетения браслетов...
25 07 2026 19:28:17
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Так как любовь, рождённая под Луной в Paке, держится не на страсти или громких словах, а на нежности и доверии...
24 07 2026 22:54:49
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Содержание статьи:Возникновение воды для похудения СассиТаким названием напиток обязан своей создательнице, косметологу из США Синтии Сасс...
22 07 2026 7:44:38
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
С наступлением жарких дней, после купания на речке и игры в песочнице, вши — дело привычное...
21 07 2026 7:32:38
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
И уж совсем конфликты – тайные или явные, превращаются в огромный клубок, который невозможно распутать, при сосуществовании в одной квартире или доме...
19 07 2026 11:20:59
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Содержание статьи:Бальзам пpaктически не имеет противопоказаний и побочных эффектов...
18 07 2026 19:56:41
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
К чему снится Автостоп: толкование по 100 авторамБольшой семейный сонник / Ольга СмуроваСнится Автостоп , что это означаетАвтостоп — Если вам приснилось, что вы подвезли на машине человека, голосующего на дороге — это символизирует препятствия в делах из-за вмешательства третьих лиц или из-за необходимости срочно заняться другими делами, связанными с друзьями, родственниками или знакомыми...
17 07 2026 17:13:32
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
В любом случае, прежде чем отказаться от этого обряда, важно понять, а что он означает и символизирует...
14 07 2026 7:26:49
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Тем более есть много мест, где провести отпускные дни можно совсем недорого...
13 07 2026 6:12:53
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Артезианская вода...
11 07 2026 0:30:34
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Возможно, что при помощи хны ты даже пыталась изменить цвет своих волос, и правильно делала потому, что она гораздо лучше, чем краска...
10 07 2026 21:56:33
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
При этом за профессиональной помощью обращаются порядка 10-15% жертв насилия, сколько реально женщин преодолевает эту травму – неизвестно из-за недостатка данных...
09 07 2026 15:36:15
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Чтобы получить место необходимо заранее встать на очередь в детский сад...
08 07 2026 3:50:54
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Существуют разнообразные методы для решения поставленной задачи, в настоящее время есть возможность воспользоваться специальными курсами, получить помощь специалистов...
07 07 2026 13:58:56
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
ИHTиMные отношения пока не очень складываются, и это продлится до февраля года...
06 07 2026 19:21:22
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Детское недержание мочи до определенного возраста считается физиологической нормой...
05 07 2026 4:25:47
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Убавляем до 150 градусов, печем 40-50 мин до готовности...
04 07 2026 21:51:39
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Супруги подстраивались к хаpaктерам друг друга, учились вместе преодолевать жизненные трудности...
02 07 2026 19:40:36
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Однако важно различать черную и красную бузину...
01 07 2026 3:30:14
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
И помогает подросткам в этом Интернет...
30 06 2026 2:13:51
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Ниже будет описано, как ухаживать за пеларгонией и вырастить маленький сад в квартире...
28 06 2026 3:24:21
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Еще:
Знания -1 :: Знания -2 :: Знания -3 :: Знания -4 :: Знания -5 :: Знания -6 :: Знания -7 :: Знания -8 :: Знания -9 :: Знания -10 :: Знания -11 :: Знания -12 :: Знания -13 :: Знания -14 ::
