Notice: Undefined index: source in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_top.php on line 245
Notice: Undefined index: HTTP_REFERER in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_top.php on line 255
Вирусологические исследования
Реакция коагглютинации (РКОА) основана на способности белка А золотистого стафилококка (штамм Cowan 1) соединяться с Fc-фрагментами lg человека. При этом Fab-фрагменты остаются свободными для реакции с гомологичными антигенами.
Основываясь на этом принципе, Мазанкова Л. Н. и Косоротико-ва А. И. внедрили в пpaктику тест твердофазной коагглютинации для индикации ротавирусного антигена в фекалиях больных. В качестве диагностикума использовали микробные клетки стафилококка, обработанные гипериммунной сывороткой против ротавируса обезьян (SA 11). Титр антигена определяли по наибольшему разведению, вызывающему коагглютинацию бактерий, покрытых антителами (на ++) на твердой фазе лунок панелей из полистирола.
Авторы установили специфичность теста при обследовании 410 детей в возрасте от 1 месяца до 14 лет, из которых у 84 (21%) идентифицирована ротавирусная инфекция (Мазанкова Л. Н., Косоротикова А. И., 1989).
Применение РКОА параллельно с ИФА и РАЛ показало близкую корреляцию результатов использованных методов (Zhang Y. et al., 1989 Pereira V. et al., 1992 Jap K. et al., 1992). Однако имеются сведения о появлении неспецифических реакций с копроматериалами, которые можно устранить предварительной адсорбцией взвесью стафилококков.
В то же время, несмотря на совпадение результатов обследования материалов РКОА и ИФА, чувствительность ее и специфичность оказалась ниже, чем у ИФА и сравнима с латекс-агглютинацией (Jap К. et al., 1992).
Таким образом, результаты применения РКОА позволяют рекомендовать ее для диагностики ротавирусной инфекции в лабораториях, где отсутствует возможность использования более чувствительных и специфичных методов. Однако апробированная в последнее время модификация РКОА и радиоиммунопреципитации с использованием белка А золотистого стафилококка позволила значительно повысить чувствительность и специфичность метода и изучить иммунологический ответ к VP2, VP6 и NSP2 в сыворотках и копроматериалах детей с RV инфекцией (Colomina I. et al., 1998).
Реакция агглютинации латекса (РАЛ) применяется в лабораторной пpaктике в связи с усилившейся в последние годы тенденцией использовать в качестве носителей антигенов и антител инертных синтетических материалов. С этой целью используют полистирольные латексы — синтетические глобулы со стандартным размером частиц около 0,8 мкм.
Более мелкие по размеру частицы (0,2-0,3 мкм) оседают в реакциях медленно и требуют ультрацентрифугации в процессе приготовления диагно-стикума, крупные же ( 1 мкм) часто дают неспецифические реакции. Частицы латекса, предварительно адсорбированные антителами (антигенами), приобретают способность агглютинироваться в присутствии гомологического антигена (антитела) и визуализируют специфический комплекс антиген-антитело.
С целью повышения специфичности и чувствительности метода латексные частицы могут быть сенсибилизированы иммуноглобулинами (Amer A. et al., 1990). В связи с простотой и скоростью проведения исследования, а также низкой стоимостью латекс-агглютинация используется в лабораторной пpaктике достаточно широко: Ruggeri F. et al., 1992.
В настоящее время налажен выпуск коммерческих тест-систем для латекс-агглютинации, что послужило основанием для проведения работ по сравнительной оценке их диагностической эффективности.
Обобщенные результаты оценки РЛА и других лабораторных методов обнаружили, что показатели чувствительности и специфичности РЛА по сравнению с ПЭМ, ИФА, ЭФ в ПААГ были достаточно высоки и равнялись 70-96% и 80-100% соот-ветствено (Santos N. et al., 1989 Molyneaux P. J. et al., 1989 Amer A. et al., 1990 Hendricks M. K. et al., 1995). Применение моноклональных антител еще более повышало диагностическую ценность РЛА (Dennehy Р. et al., 1988 Zbinden R. et al., 1992 Sanchez R. et al., 1993).
Наряду с коммерческими латекс-системами исследователи применяют и лабораторные тесты, которые дают сопоставимые с ними результаты (Amer A. et al., 1990).
В то же время ряд авторов указывали на то, что применение РЛА не лишено недостатков, так как дает определенное число ложных результатов. Так, при обследовании 200 больных детей методами ИФА и РЛА выявлено 11 ложнонегативных проб при показателях чувствительности и специфичности равных 86 и 95% соответственно (Amer A. et al., 1990).
Позднее другие авторы при обследовании 585 проб стула больных детей методом РЛА и ЭФ в ПААГ получили показатели чувствительности и специфичности равные 96 и 100% соответственно. При этом обнаружено 6 ложноотрицательных и 3 ложноположительных результата в отличие от ЭФ в nAAT.(Zbinden R. et al. 1992).
По данным Hendricks М. К. et al. обследование 103 детей в возрасте от 1 месяца до 5 лет методами ПЭМ, ЭФ в ПААГ и РЛА показало, что чувствительность этих методов равнялась 84, 90 и 80%, а специфичность 100, 100 и 81% соответственно. Авторы обнаружили 15% ложноположительных результатов по данным РЛА (Hendricks М. К. et al., 1995), что может быть связано при рота-вирусном гастроэнтерите с наличием крови в исследуемом материале.
В связи с этим при получении положительных реакций в РЛА с образцами, содержащими кровь, результаты следует интерпретировать с осторожностью и подтверждать другими методами (Bendall R. et al., 1991).
Таким образом, РЛА представляет собой наиболее простую диагностическую реакцию обнаружения ротавирусов. Являясь ценным методом экспресс-диагностики и обладая высокими показателями чувствительности и специфичности, этот метод, однако, не имеет никаких преимуществ перед ИФА, ПЭМ, ЭФ в ПААГ, кроме скорости проведения реакции, и нуждается в подтверждении другими методами.
Резюмируя материалы, следует отметить, что в целом осадочные тесты находят широкое применение в лабораторной диагностике ротавирусной инфекции в связи с высокой чувствительностью и скоростью получения результатов, простотой постановки и учета, а также отсутствием необходимости использования сложного оборудования и дорогостоящих реагентов.
Диагностические методы, основанные на выявлении вирус-специфических РНК. Разработка молекулярно-биологических методов в вирусологии привела к внедрению в пpaктику ряда новых диагностических тестов, основанных на выявлении вирусных РНК.
Их использование открыло возможность подхода к молекулярной эпидемиологии и позволило решить некоторые вопросы таксономии ротавирусов. Одним из первых диагностических методов этой группы стал электрофорез вирусного генома в геле.
Электрофорез вирусных РНК в полиакриламидном геле (ЭФ в ПААГ) достаточно универсален и широко распространен как в научно-исследовательских, так и пpaктических лабораториях. Благодаря своей высокой специфичности и чувствительности он позволяет решать целый комплекс проблем, связанных с ротавирусной инфекцией, и находит применение в диагностике, эпидемиологии и профилактике.
Возможность применения этого метода обусловлена уникальным хаpaктером распределения в геле одиннадцати сегментов вирусного генома и большой устойчивостью ротавирусной РНК к действию факторов окружающей среды. Существует несколько модификаций проведения ЭФ в ПААГ.
Незначительно отличаясь друг от друга, все они основаны на экстpaкции РНК ротавирусов, разгонке выделенных РНК в полиакриламидном геле под воздействием электрического поля и визуализации результатов разгонки РНК вирусного генома. Изменения могут быть на каждом из этих этапов проведения ЭФ в ПААГ. Так, выделение РНК ротавируса может проводиться непосредственно из фекалий, минуя стадию получения очищенного вируса возможно предварительное разделение одно- и двунитчатых РНК, введение метки 32Р, обработка исследуемого материала нуклеазой S1, разрушающей однонитчатые РНК структуры варьирует состав буферных растворов, процентное содержание разделяющего и концентрирующего геля сила тока при электрофорезе, методы окраски.
Время проведения исследования составляет 24-36 часов. В результате на полосах геля после его окраски нитратом серебра или этидиум-броми-дом выявляются профили вирусной РНК, соответствующие 11 сегментам генома вируса (Unicomb L. Е. et al., 1993 Assouli S. M. et al., 1995 Bos P. et al., 1995 Васильев Б. Я. и др., 1995 Szczepaniak Z. et al., 1996 Holmes J. H., 1996 Steele A. D. et al., 1996 Markowska-Daniel J. et al., 1996 Espinoza F. et al., 1997 Adah M. et al., 1997 Wu H. et al., 1998).
При соблюдении стандартности условий проведения электрофореза расположение сегментов генома достаточно стабильно и позволяет идентифицировать изолят на основе индивидуальности его фореграммы. Следует отметить, что хаpaктер распределения сегментов генома на фореграмме является генетически устойчивым признаком, и любые изменения в аминокислотной последовательности генома влекут за собой изменение скорости миграции вирусных белков (Kuzuya М. et al., 1996).
Более того, хаpaктер фореграммы, присущей определенному изоляту, может служить в качестве инструмента для расшифровки вспышек, выявления путей и источников заражения (Oishi J. et al., 1993 Broor S. et al., 1993 Beque R. et al., 1992). К тому же, именно этот метод позволил разделить ротавирусы на две подгруппы с так называемыми «короткими» или «длинными» фо-ретипами (обусловленными меньшей или большей подвижностью 10 и 11 сегментов генома), что имеет принципиальное значение для классификации RV популяции.
Следовательно, ЭФ в ПААГ может быть с успехом использован в диагностике, эпидемиологии, классификации и по отношению к целому ряду методик (РАЛ, ГА, выделение вируса на культуре клеток) — референс -методом.
Исследования, проведенные рядом авторских коллективов, показали, что ЭФ в ПААГ обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Сравнительное изучение этих параметров применительно ЭФ в ПААГ, ПЭМ и РЛА, проведенное при обследовании 103 детей, показало, что чувствительность составляла 90, 84 и 80%, а специфичность 100, 100 и 81% (Hendricks М. К. et al., 1995).
Аналогичные данные, с привлечением помимо указанных методов еще и ПЦР и ИФА получены Buesa J. и Husain М. Правда, чувствительность ЭФ в ПААГ, по данным этих авторов, несколько уступает результатам ПЦР и ИФА, однако специфичность составляет 100% (Husain М. et al., 1995 Buesa J. et al., 1996). Подобные результаты получены и нами при исследовании фекалий от 50 больных ОКЗ методами ПЭМ, ИФА и ЭФ в ПААГ. Показатели положительных находок в ЭФ в ПААГ составили 28% против 35% в ИФА и ПЭМ.
Однако следует отметить, что в трех пробах, где ротавирусы в ПЭМ обнаружены не были, по данным ЭФ в ПААГ зафиксирована фореграмма, хаpaктерная для ротавируса (Васильев Б. Я. и др. 1990). Более поздние наши исследования, проведенные на материале 510 больных ОКЗ с использованием ИФА, ПЭМ и ЭФ в ПААГ, позволили нам подтвердить ротави-русную этиологию заболевания в 37 и 23% соответственно (Васильев Б. Я. и др.
1995).
Maldonado A. et al. (1998) при сравнительном исследовании копроматериалов детей, госпитализированных с диареей, методами ЭФ в ПААГ и ИФА документировал RV природу заболеваний в 42,7 и 49,5% соответственно.
Необходимо отметить, что помимо горизонтального применяется и вертикальный электрофорез, который, по мнению ряда авторов, сопоставим с горизонтальным по специфичности и чувствительности, но более прост. При его проведении для визуализации результата авторы предлагают включать бромистый эти-дий непосредственно в гель и использовать один и тот же гель для нескольких исследований.
Ими также было сконструировано устройство с ультрафиолетовой подсветкой, позволяющее легко и удобно читать фореграммы (Zbinden R. et al., 1992).
Модификацию вертикального электрофореза с визуализацией фореграмм методом серебрения предложили Giardano М. О. et al. (1997). Полученные ими данные показали, что новая модификация чувствительнее, специфичнее и дешевле, чем общепринятый ЭФ в ПААГ.
Таким образом, метод ЭФ в ПААГ в настоящее время нашел широкое применение в лабораториях разных стран для диагностики RV. Многочисленные сравнительные испытания этого метода с ПЭМ, ИЭМ, РАЛ и ИФА свидетельствуют о его высокой специфичности и чувствительности, а также возможности применения ЭФ в ПААГ в качестве референс-метода при изучении новых тест-систем.
Использование электрофореза в полиакриламидном геле с целью выявления источников инфекции и путей ее распространения, а также расшифровки этиологии эпидемических вспышек явилось основой для успешного решения актуальных вопросов молекулярной эпидемиологии.
Процесс переноса белков (Western-blot) или нуклеиновых кислот (Dot-blot или Northern-blot и Southern-blot) из электрофоретической матрицы и их иммобилизация на поверхности твердой фазы называется блотингом, а полученный отпечаток — блотом. При анализе блотограмм с помощью иммунных сывороток метод называют иммуноблотингом.
В качестве зондов обычно используют либо РНК, трaнcкрибированные in vitro на матрице вирусного генома, либо клоны комплементарной ДНК, полученной на матрице вирусного генома с использованием обратной трaнcкриптазы и последующим молекулярным клонированием. Ранее метку зондов осуществляли изотопами 125J или 32Р, но в последние годы применяют нерадиоактивные метки — биотин или ферменты (щелочная фосфатаза, пероксидаза и др.), что существенно упрощает метод, поскольку снимает вопросы изотопной безопасности.
В этом случае результаты реакции фиксируются в виде цветовых пятен, образующихся под воздействием фермента на добавляемый субстрат, что свидетельствует о гибридизации зонда с РНК вируса в исследуемом материале.
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
В то же время, несмотря на свою прочную конструкцию, топаз представляет собой изумительной красоты и нежности камень, который имеет свои хаpaктеристики и особый, мистический смысл...
04 06 2026 9:25:48
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Одежда из палитры серых оттенков всегда найдет свое место в женском гардеробе и достойно представит обладательницу серого платья каждый день...
03 06 2026 22:19:12
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Отсюда глаголы майданить, майданничать — «мошенничать, промышлять игрою мотать, прогуливать и проигрывать свое»...
02 06 2026 22:59:23
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Содержание статьи:Мир ароматовАроматов — сотни, и чтобы не потеряться в этом благоухающем мире, французские парфюмеры ещё в 1990 году выделили в нём несколько больших групп...
01 06 2026 3:30:28
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Рожденные 3 марта обладают способностью не только увидеть целостную картину событий, но так же хорошо сфокусироваться даже на мельчайших деталях...
31 05 2026 23:17:20
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Федосюк приводит поговорку: «Смолоду кривулина, под старость кокора»), либо упрямого, своенравного человека, либо имеющего изрытое оспой лицо: в русском языке было слово кокореватый — «корявый, с бугорками и ямками (о лице, носе)»...
30 05 2026 18:13:34
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Но пройти эту процедуру обязательно, чтобы доказать родственникам и друзьям, что он действительно подходящий жених для прекрасной невесты...
29 05 2026 19:45:40
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Но почему одни люди болеют раз в год или вообще длительный период не заболевают, тогда как другие могут переболеть пять-шесть, а то и больше раз за один сезон? Как утверждают специалисты, ведущую роль в этом играет состояние нашего иммунитета...
28 05 2026 15:58:32
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Тесто всегда вымешивал могучими руками мой дед...
27 05 2026 22:40:18
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Поселение удалено от Азовского моря примерно на 6-8 км...
26 05 2026 9:41:13
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Оно зафиксировано в XV -XVII вв...
25 05 2026 18:25:48
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Утром, уходя на работу, владельцы автотрaнcпорта, особенно это касается проживающий в мегаполисах, сидят в долгих пробках, пока доберутся до нужного местоназначения...
24 05 2026 18:57:34
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Под действием препарата понижается артериальное давление и расширяются кровеносные сосуды...
23 05 2026 19:27:13
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Запоминание какой-то информации происходит каждый день...
22 05 2026 6:49:14
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
День Энергетика в 2019 году какого числа – 22 декабря 2019 годаДень Энергетика в нашей стране был учрежден еще в 1966 году...
21 05 2026 1:18:27
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Многие врачи рекомендуют беременным женщинам принимать всевозможные витаминные комплексы, коими уставлены прилавки любой аптеки...
20 05 2026 20:50:30
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Следом пропадает желание гулять на улице...
19 05 2026 2:20:41
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Никелевая свадьба является достаточно традиционным торжеством, которое имеет свои приметы, особую обстановку и церемонии...
18 05 2026 12:29:45
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Интересуется жизнью Иисуса Христа в то время, когда все ее сверстники читают сказку о Красной Шапочке...
17 05 2026 14:46:46
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Сама беременность на протекание заболевания особо не влияет...
16 05 2026 2:37:13
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
В магазине из десятков пакетов с молоком выберет протекающий, встанет в самую медленную очередь и привычно вздохнёт, когда кассовый аппарат сломается прямо перед ним...
15 05 2026 11:57:56
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Как правило, каждый третий ребенок загружает видео на YouTube в надежде прославиться и стать материально независимым...
14 05 2026 8:29:26
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
К чему снится Витамины: толкование по 100 авторамСонник XXI векаВитамины во сне к чему снятсяВитамины – Если во сне вам назначили витамины в качестве лечения, то вам предстоит решить трудную и серьезную задачу, не отказывайтесь от помощи, если она вам будет предложена...
13 05 2026 16:57:55
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Что ему нужно? Что чувствует сам изменщик?Всё просто и бaнaльно...
12 05 2026 4:35:30
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Начинать их нужно преждевременно...
11 05 2026 22:29:19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Но не стоит отчаиваться – вам поможет Юпитер, который подарит силу, решительность и уверенность в себе...
09 05 2026 16:48:14
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
По некоторым причинам данный прогестерон может чрезмерно повышаться, что грозит неприятными последствиями...
08 05 2026 17:19:51
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
И сообщает о не просто нетрадиционных, а поистине фантастических брачных церемониях...
07 05 2026 4:42:48
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Как таковую стадийность процесса проследить трудно, но выделяют три формы или стадии (ни различаются по степени тяжести)...
06 05 2026 13:52:58
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
вместе с переселенцами он попал в Вавилон...
05 05 2026 12:41:51
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Семян много, они высокого качества и нормально хранятся...
04 05 2026 14:37:59
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Перед тем, как регистрироваться, никому не помешает почитать самые разные советы и отзывы в сети «Интернет» на тему «Продажа текстов на биржах статей»...
03 05 2026 15:44:55
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Первый тип включает в себя хаpaктерные черты своего века – его стиль, философию, сильные и слабые стороны...
02 05 2026 5:46:29
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Но я просто забыл, как выглядит метро в час пик — народу было столько! Кое-как я втиснулся в вагон, хотя многим это сделать не удалось...
01 05 2026 2:51:35
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Поэтому откладывать визит в поликлинику и заниматься самолечением при гайморите недопустимо...
30 04 2026 19:58:34
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Но многие знают, что для эффективного лечения нужно было принимать его четыре раза в день, а длительный прием провоцирует массу побочных эффектов...
29 04 2026 23:15:19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Возьмём, к примеру, Maндалу...
28 04 2026 11:14:35
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Подуйте на него: в качественном мехе ворсинки сразу же вернутся на место...
27 04 2026 11:24:46
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Тенденции моды коснулись и обуви в том числе...
26 04 2026 7:32:37
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Мы привыкли уже к более или менее спокойной жизни, к финансовой стабильности, к тому, что очень жестко экономить и ограничивать себя не нужно...
25 04 2026 22:37:18
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Лохии (научное название этого явления) – это один из важных сигналов организма о происходящий процессах...
24 04 2026 9:18:55
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Перед каждым пациентом, страдающим от явлений ОРВИ с постоянным течением соплей, стоит серьезный вопрос – чем лечить насморк, чтобы терапия была быстрой и эффективной...
22 04 2026 9:10:59
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
А если ссоры начинают переходить в хаpaктерные упреки и последующие скандалы, то лучше задуматься не только о том, как мириться с мужем, а как не создавать более причин для ссор...
21 04 2026 20:35:14
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Эта поездка является одной из отправных точек рождения и становления новой ячейки общества...
20 04 2026 17:34:59
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
С помощью данного метода диагностируют патологические изменения переднего отрезка глаза (века, конъюнктиву, измерение толщины роговицы)...
19 04 2026 16:11:52
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
К чему снится Валет: толкование по 100 авторамВалет в ночных грезахвалет (карточная фигура) – Знакомство, которое может привести к бpaку...
18 04 2026 7:56:21
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Состояния эти протекают достаточно болезненно для малыша: он сильно плачет, поджимает ножки, краснеет, тревожно спит и у него урчит в животике...
17 04 2026 13:27:19
Notice: Undefined variable: nooutput in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 15
Notice: Undefined variable: yarss in /var/www/iq22059882/data/www/bookcovers.ru/i_main_cached.php on line 19
Содержание статьи:Бамбуковый массажБамбуковый массаж делается на определённую точку и является одним из наиболее эффективных видов массажа, когда дело доходит до борьбы с простудой или гриппом...
16 04 2026 14:19:40
Еще:
Знания -1 :: Знания -2 :: Знания -3 :: Знания -4 :: Знания -5 :: Знания -6 :: Знания -7 :: Знания -8 :: Знания -9 :: Знания -10 :: Знания -11 :: Знания -12 :: Знания -13 :: Знания -14 ::
